关于取卵无胚胎可用是和取卵后三天看胚胎等级很多朋友都不是太了解,今天佳运育儿网小编就带大家一起来了解一下,希望本篇文章能够帮助到大家,感谢大家关注佳运育儿网,我们将为您提供专业的建议和帮助。
试管婴儿怎么培养胚胎
试管婴儿怎么培养胚胎,不孕不育并不可怕,试管婴儿是许多不孕夫妇的最后选择,试管婴儿需要通过检查排卵、取卵取精。试管婴儿的好处还有很多。以下分享试管婴儿怎么培养胚胎。
试管婴儿怎么培养胚胎1一、什么是试管婴儿的胚胎培养?
胚胎培养是指人类配子以及接受体外受精治疗的胚胎培养,卵子和精子结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,培养3-6天,让他从一个细胞分裂多个细胞,最后发育成胚胎或囊胚。
二、试管婴儿胚胎培养的过程?
1、卵子预处理
医生获得卵子后会争分夺秒的把卵子送入实验室,一般取卵手术室和实验室是相连的,最大程度缩短卵子在体外暴露的时间。培养师拿到卵子后第一时间做处理,拨开卵子周围的颗粒膜细胞,展现卵子真正的面容。
培养师会对卵子进行评级:成熟卵、未成熟卵、变异卵。只有成熟的卵是可用卵。一般超促排的方法获得成熟卵能够达到80%的概率,就是属于正常情况。
2、精卵结合
卵子准备的同时,另一边会看精子情况。培养师会先进行观察,如果蝌蚪们一个个生龙活虎,那我们就不用为之后的结合而操心。主要通过多精子自由和卵子结合,或通过单精子注射结合,形成受精卵,再让发育成胚胎。
3、胚胎分裂和培养
精子和卵子完成结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,让他从一个细胞分裂多个细胞。
第一天:从1个细胞分裂成2个细胞
第二天:从2个细胞变成4个细胞
第三天:从4个细胞变成8个细胞
第四天:胚胎往往就挤在一起成为了一个大球,这个叫融合状胚胎
第五天:形成细胞团俗称囊胚。
试管婴儿怎么培养胚胎2试管婴儿的过程是怎样的
1、控制性超排卵
由于自月经周期的长短因人而异,同一患者不同周期也存在差异,所以不易安排取卵时间,而且自然周期中只有一个优势卵泡发育,受精后只能形成一个胚胎,而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。
所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的,提供多个胚胎移植,并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。
控制性超排卵一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调,再施与HMG或FSH排卵药物,刺激卵巢中的卵泡成长,依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量,患者的年龄及药物的使用剂量不同,所获得的卵子数亦不同。
2、监测卵泡
为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间,须利用阴道B超来监测卵泡大小,并配合抽血检查E2值(雌激素),调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当,便可注射人绒毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34-36小时取卵。
3、取卵
最常用的取卵方式是在的局部麻醉下,经阴道B超引导,将取卵针穿过阴道穹窿,直达卵巢吸取卵子,并立即在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中,置37°C的培养箱中培养。
4、取精
精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手,用【自】慰法留取精液。所给的小杯是无菌的,留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。
5、体外受精
取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中,共同培养18小时后,可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差,无法自然受精,则必须以显微注射法强迫受精(参考卵细胞浆内单精子显微授精)。
6、胚胎移植
受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据患者的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目,多余的胚胎可冷冻保存。
胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2-3天移植胚胎,我所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间,对体外培养的条件要求就越高,但推迟移植时间更符合妊娠生理,同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
7、胚胎移植后补充激素
目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。如果确定妊娠,则改用hCG继续补充到怀孕10周。
胚胎移植后14天,可由验尿或抽血确定是否妊娠。
试管婴儿怎么培养胚胎3试管婴儿养囊条件
1、卵子的质量精子的质量。实验室的环境。胚胎师的专业度。
2、而且培养的囊胚本来也不是一件容易的`事,对实验室的要求很高,实验室的氧气量,温度的变化都会影响最后的结果。而且精子和卵子的质量不好的话,胚胎也容易停止生长。
3、卵泡个数少,胚胎质量一般的建议不要养囊,养囊对胚胎质量要求比较高,一般胚胎移植是在取卵后第三天进行,这个时候的胚胎含有5~8个细胞,而囊胚是指胚胎在体外培育5~6天,达到数百个细胞,这个时候植入女方子宫就叫做囊胚移植。
什么是养囊
养囊也叫囊胚培养,是“囊胚是胚胎体外培养”的终末阶段,它通常形成于卵子受精后的第5-7天。自然状态下,人类胚胎以囊胚的形式植入母体。进行囊胚移植,能获得较高的胚胎植入率。因此,进行囊胚培养、囊胚移植,始终是医患双方都感兴趣的一个选择。
胚胎培养实验室更是精密仪器成堆的神秘场所,是人类科技的巅峰体现之一。但实际上,自然状态下,母体提供了胚胎免光照、恒温、恒气体分压(最符合胚胎需要的二氧化碳、氧、氮分压)、最合理配比的营养物质及至关重要的必要细胞因子(并且所有这些物质保持动态更新、不存在代谢废物过度堆积)等条件。这些条件在实验室里,不是仅能粗略模拟,就是完全做不到。
每个做试管婴儿的人都会经历术前检查、促排卵、取卵(取精)等一系列过程,取完卵后在家焦急地等待3天后的结果,那这3天,精子和卵子又经历了什么?过了3天拿到了实验室结局告知单,急切地想知道我的胚胎发育好不好,是几级胚胎哈?是不是优质胚胎?普通胚胎和优质胚胎怎么看,有什么区别?其他人都有冷冻,为什么我的要养囊?,这篇文章将一一为你解答。
我们的工作流程是这样的:上午女方取卵,男方取精。我们把这一天定义成第0天,记做Day 0
(经阴道穿刺取卵示意图)
女方取卵,穿刺取出来的其实是卵泡液,卵子就生活在卵泡液中。卵泡液经过卵子操作平台,实验室工作人员在显微镜下,从血淋淋的卵泡液中用细管吸出卵子,用干净的培养液洗涤2次,把卵子边上的血性液体洗掉,然后放置在培养液中,放入培养箱内,等待和精子受精。
(图中显示显微镜下看到的卵子,是不是和你想象中差异很大哈)
女方取卵的同时,男方取精。取出的精液放置在室温下半个小时至1个小时,待精液液化后,进入洗精操作平台,精子经过洗涤后,那些活力差的精子会被淘汰掉,留下来的基本上都是活蹦乱跳的好精子。
(洗好的精子先放在这样的管子里)
如果洗涤后,活动精子数量够多,一般考虑做第一代试管婴儿(精子自己钻进卵子内完成受精);
(第一代试管婴儿,精子围绕在卵子周围)
如果洗涤后,精子数量很少,一般考虑做第二代试管婴儿(将精子直接注射入卵子内完成受精)。
(第二代试管婴儿,将金子注射入卵子内)
如果前次做的是第二代试管婴儿,那么一般本次也默认做第二代试管婴儿。
这个授精方式的选择,并不像买家电、买手机,第二代就一定比第一代来的好。具体做第一代还是第二代,临床医生、实验室医生会根据你的具体情况决定,选最适合你的。
下午一点半左右开始授精。如果你是做第一代试管婴儿,实验室工作人员会把洗好的精子,按照每个卵子加1万个左右精子的比例,将精子加入到卵子周围,让精子自己钻入卵子内,完成受精。(根据每个中心的经验,加入精子个数会有所差异)。如果你是做第二代试管婴儿,实验室工作人员会挑选与卵子相对应个数的的精子,将精子一对一地注射入卵子内,使其完成受精。
取卵后的第一天(Day 1),观察受精情况。实验室工作人员会在显微镜下观察每个卵子的受精情况。当然,这个就像一场考试,也是几家欢乐几家愁。有些人全部受精了,有些人部分受精了,也有情况很糟糕的一个都没有受精。至于受不受精,完全取决于卵子和精子质量。
实验室工作人员怎么样评价精子卵子有没有受精呐?原核,实验室工作人员根据原核的有无来判断是非受精。
(箭头所指示的两个圆圈即为原核)
正常受精可以看到两个原核,记录为“2PN”。异常受精或没有受精,可以见到以下情况:0PN,1PN,3PN,4PN……。至于怎么出现这些异常受精的,我们下次再说。
观察完后,将胚胎放入新的培养皿中,换上新的培养液。这一天受精卵会分裂成2个细胞
第二天继续培养,这一天受精卵会分裂成4个细胞。
(第二天,4细胞)
取卵后第3天(Day 3)早上,观察胚胎质量。激动人心的时刻到了,到了揭晓成绩的时候啦。
第3天,一般会分裂成8个细胞,但有的细胞分裂地快一点,有的细胞分裂地慢一点,一般6-12细胞都是正常的。光从个数无法说明胚胎质量。我们还会观察胚胎的外观和碎片率,对胚胎进行分级(以下内容了解即可):
Different stages of scoring a day 3 embryo-evaluating the number of cells, amount of fragmentation and symmetry of the cells(blastomeres)
(Bączkowski et al., Reproductive Biology, volume 4 No. 1, pgs. 5-22)
1级:胚胎卵裂球大小均匀,形态规则,透明带完整,胞质均匀、清晰,胚胎内碎片<10%;
2级:胚胎卵裂球大小略不均匀,形态略规则,胞质可有颗粒现象,碎片10%-20%;
3级:胚胎卵裂球大小明显不均匀,可有明显的形态不规则,胞质可有明显颗粒现象,碎片21%-50%;
4级:不可用胚胎,细胞大小严重不均匀,胞质可有严重颗粒现象,碎片超过50%。
完美的8细胞胚胎
Embryo picture of a"perfect" looking 8-cell embryo(day 3 embryo)
There is no embryo fragmentation and the cells are very even, regular, and similarly sizedWe call this is a"high quality" day 3 embryo(author Richard Sherbahn MD)
细胞数6-12个,碎片率20%以内,评级1-2级,可称为优质胚胎。我们中心记录方式为:细胞数—碎片率—评级,例如:8-5%-2,即8细胞,5%碎片率,2级。优胚就像优等生,有较高的怀孕成功率。但要说明的是,其他普通胚胎也是可以怀孕的。
胚胎比较多的,一般会把它们冷冻,等以后解冻使用。一般前2管,每管会放1-2个优质胚胎,第3管开始一般会多放几个胚胎。
我们的冷冻记录方式如下:
F1:①6-1②8-2 F2:①8-15%-2②10-15%-2
F3:①②③④⑤ F4:①②③④
以上代表您一共冷冻有4管胚胎,分别用F1、F2、F3、F4来区分,第一管F1里面有2个胚胎,分别是6细胞,1级;8细胞,2级;第2管F2里面有2个胚胎,分别是8细胞,15%碎片率,2级;10细胞,15%碎片率,2级;F3有5个胚胎,F4有3个胚胎。
如果身体条件很好,体内激素水平恢复正常,子宫内膜条件适合移植,则在这一天行鲜胚移植,根据情况,会挑选1-2个胚胎进行移植。
(B超阴道下,将胚胎注射入子宫)
多数人取卵后身体尚未恢复,体内激素水平一般比较紊乱,所以不行胚胎移植,将所有可用胚胎冷冻。
如您的胚胎较多,建议冻存2管左右的优质胚胎,其余胚胎养囊处理。什么是养囊?就是让胚胎在实验室培养液内再生长2-3天,看看有没有发育潜能,发育潜能好的,能够继续发育成囊胚;发育潜能差的,一般就无法存活。这是一个优胜劣汰的过程,模拟了体内生长过程,减少冷冻管数及费用,同时减少移植失败的次数。
如果您的胚胎质量比较一般,但经过评估后丢弃又可惜了,也建议养囊。有发育潜能的就能够继续存活下来,然后行囊胚移植,囊胚移植更接近人体正常的种植过程。
当然,养囊会损失一部分胚胎,这个您需要有心理准备,但一般来说养囊不成的胚胎,移植到体内受孕概率也是很低的。
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一般来说,胚胎的移植或是冷冻要么发生在第三天要么发生在第五天。卵子刚取出来,只是单细胞,受精12-24小时后在培养液里发育并分裂,所以到第三天一般是4-8细胞的胚胎(Embryo)。而到第五天,大约发展成上百个细胞,此时胚胎也被称被囊胚(Blastocyst)。界于两者之间(一般是第四天),还有一个阶段叫桑葚胚(morula),因桑葚胚比较难评级,一般不做评级。
第三天(D3)胚胎的评级
一般来说,胚胎评级跟以下几个因素有关,胚胎的细胞数,分裂后细胞的均匀程度,以及碎片程度。这里先说一个比较常见的分级法,是从一级到四级,一级最好,四级最差,胚胎级别描述:
一级细胞分裂均匀;没有碎片
二级细胞分裂均匀;有少许碎片
2.5级细胞分裂大致均匀,有些碎片
三级细胞分裂不均匀;没有碎片或有些碎片
四级细胞分裂非常不均匀;碎片比较严重
这里要补充说一下为什么会有碎片。碎片的生成是细胞凋亡的征象,当胚胎受到自身原因或体外环境压力时,会产生DNA修复机制,排出对机体有害的细胞成分,导致碎片的生成。所以碎片越多的胚胎,生长潜力可能越差,这成了判断胚胎好坏的一个重要标志。
一般一级和二级的第三天胚胎都是很不错的。三级的差了点,但还可用。四级则不太会被移植或冻起来。比如说你被告知第三天的胚胎是一个一级8细胞的,那么恭喜你,成功的可能性还是挺大的。当然,胚胎的好差还跟病人的年纪有关,同样的一级8细胞,年轻女子的染色体变异系数非常低,而年纪大的变异系数却相对高很多。
有些诊所喜欢用罗马字I-IV来表达第三天的胚胎评级,有些喜欢用A-D来表达。其实参照的描述是差不多的。有些喜欢用三个数字来表示,比如D3的811,第一个数字是细胞数目(8个),第二个数字表达碎片多少(1是几乎没有),第三个数字是表达细胞形态(1为最佳),所以我们可以得知这个811是个几乎完美的第三天胚胎。
第五天(D5)囊胚的评级
根据囊胚腔的大小和是否孵化,将囊胚的发育分为六个时期。
1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;
2期:囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2;
3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积;
4期:扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄;
5期:正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出;
6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出。
处于3至6期的囊胚,还需对其内细胞团和滋养层细胞进行质量分级。
内细胞团分级:
A级,细胞数目多,排列紧密;
B级,细胞数目少,排列松散;
C级,细胞数目很少。
滋养层细胞分级:
A级,上皮细胞层由较多的细胞组成,结构致密;
B级,上皮细胞层由不多的细胞组成,结构松散;
C级,上皮细胞层由稀疏的细胞组成。
三个数字结合起来,就能大致知道囊胚的形态。比如4AA囊胚,它是一个细胞排列紧密、几乎没有碎片、还没有孵出的囊胚,通常被认为最适合移植的囊胚。5AA或6AA,虽然看起来比4AA的更有发育潜能,但因为部分细胞已从透明带逸出,在实质移植操作中反而不如4AA的囊胚更好。
其实还有D级的分级。但一般到了D级质量就无法移植或值得冻起来,所以我们只谈到C级。我们已知道,每个诊所接纳的最低级别不太一样,比如有的接纳的最低级别囊胚是3CC,低于此级别的,则没有移植或冻起来的意义了。此外病人卵多卵少,也会影响诊所对囊胚的取舍,一些大促诊所,见病人胚胎多的,3BC这样的级别可能就舍掉不用了,而对卵少的病人来说,一个3BC也许就能活产一个孩子!
有些胚胎发育慢,到第六天(D6)甚至第七天(D7),才发育成囊胚。因此,除了三个数字以外,囊胚的天数还是判断其发育潜能的重要指标。通常来说,D5的最好,D6的次之,D7的再次之。再晚一点发育的,基本上被认为没有什么发育潜能,只好放弃。D7形成的囊胚虽然慢了点,移植成功率也低了点,但是能挺到这个时候还没有“光荣牺牲”,也已经相当优秀了,所以也不要轻言放弃。
好了,文章到此结束,希望可以帮助到大家。
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