什么是d3胚胎 d3冻胚是优胚吗

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狗狗究竟吃什么才是真的补钙

狗狗身体不可以缺少钙质，只有不缺钙，才能维护狗狗身体和骨骼的健康，那么狗狗吃什么可以补钙，缺钙又有什么症状呢？

狗狗吃什么补钙：

1、食物补钙

蛋黄，都知道，可以帮助狗狗靓丽毛发，而且含有的钙质比较高，可以给狗狗补钙，但是蛋黄吃多了，容易不消化，所以主人要控制好狗狗吃蛋黄的数量，一周2~3个即可。还有豆制品、虾皮含钙量也很丰富，平时可以适量给狗狗吃。

2、选择高钙的狗粮

想要帮狗狗补钙，可以针对性地选择一些高钙的狗粮。有些狗粮的营养比较单一，狗狗长期吃的话可能缺乏某种元素，所以选择营养均衡的狗粮是非常重要的，钙含量高的狗粮，能增强狗狗骨骼，营养均衡，平时偶尔再搭配别的的新鲜的辅食，那就更好了。

3、选择补钙产品

如果狗狗出现O型腿、X型腿、双排齿，甚至是骨骼发育不良等缺钙现象时，主人需要注意了。这已经不是单单喂食钙质含量高的食物就可以了的，因为天然食物中的钙质被吸收的过程太慢了，这会错过狗狗的补钙时机，造成缺钙问题更加严重。主人在食补的基础上，给狗狗喂食宠物羊乳螯合钙，天然乳钙，温和吸收不伤胃，能够补充骨骼养分。

缺钙的症状：

狗狗缺钙的表现还是比较明显的，如果发现自己家的狗狗在跑步时总是跑不稳，或者站立的时候也会不稳，喜欢坐在地上，也许就是缺钙了，还可以触摸狗狗的腿部，严重缺钙的话，狗狗的关节也会和正常时不同，会发生不同程度的变形。

FRT细胞是什么细胞

基因打靶包括：胚胎干细胞的获得和培养、打靶载体的构建、重组ES细胞的筛选、嵌合体小鼠的制备、基因敲除小鼠的建立、Cre-loxP系统、FLP/FRT系统和条件性基因敲除、基因敲入和大规模ES细胞突变库的建立。基本概念 1.基因打靶：是利用同源重组技术来定点改变物种的基因组顺序和结构，从而在突变的个体内来研究基因及基因组的功能。 2.基因敲除：是使用基因组中某个/某几个基因或基因的顺式元件产生缺陷，从而在突变体内。 3.丧生正常的功能，来推测这些基因或元件原来在体内的功能。基因敲入：在个体基因组中定点加入某个/某几个基因或顺式元件，使之表达或发挥作用，从而研究该基因或顺式元件在体内的功能。 4.基因打靶技术是一种定向改变生物活体遗传信息的实验手段。它的产生和发展建立在胚胎干细胞技术和同源重组技术成就的基础之上，并促进了相关技术的进一步发展。自1987年早期胚胎干细胞技术建立及第一例基因剔除小鼠诞生以来，基因打靶的研究进展迅速，给现代生物学和医学研究带来了革命性的变化，并直接引发了现代生物学和医学研究各个领域中许多突破性的进展，成为后基因组时代研究基因功能最直接和最有效的方法之一。一、胚胎干细胞的获得和培养基因打靶中用的小鼠ES细胞系有：D3、E14、R1、J1、CCE，均来源与129小鼠品系和其杂交品系。ES623和B6-IIIES细胞系，来源于C57BL/6小鼠品系。BALB/c-I，来源于BALB/c小鼠品系。常用的饲养层细胞为PMEF（小鼠原代胚成纤维细胞）。建立ES细胞的过程中，最好采用只传了2-3代的原代小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养细胞，所取得的ICM（内细胞团）只有10％-30％的几率建立ES细胞系。一旦ES克隆被确定，接下来应该考虑检查ES细胞的核型。 2、ES细胞的核型分析建立的ES细胞有相当的比例（30-50％）不具备正常核型，故需进行核型分析。C带技术进行核型分析：小鼠细胞有40条染色体（19对加两条性染色体）。常染色体和X染色体的中心着色很深，而Y染色体的着色很浅。 3、ES细胞的扩增一旦ES细胞系中高比例的细胞被确定有正常二倍体染色体数目，这一ES细胞需要较大量扩增和冻存。每5－6天ES细胞需经胰蛋白酶消化，以有效的低密度接种到新鲜培养基中，以保持细胞的不分化状态。60mm平皿最大细胞密度1-2×107。PMEF需6Gy的X射线照射或丝裂霉素C处理细胞抑制生长后才能用作饲养细胞。二、打靶载体的构建打靶载体通常包括2个同源重组臂，用于指导打靶载体和染色体上的靶基因序列发生同源重组。同源重组臂上含有一个正筛选基因（neo），通过G418筛选，一个负选择标记的胸苷激酶（tk）基因。三、重组ES细胞的筛选 1.饲养细胞的准备；2. ES细胞的准备；3.转染ES细胞；4.挑取ES克隆；5. 96孔板ES细胞备份与细胞冻存；6. Southern杂交，。四、嵌合体小鼠的制备 1. ES细胞的复苏；2. ES细胞的囊胚注射。注意：每天留一些ES细胞备第二天注射，注射通常持续1-2周；ES细胞注射到3.5天的小鼠囊胚，每只囊胚可注射10-20个ES细胞，注射的胚胎移入2.5天的假孕小鼠的子宫，每测子宫可接受9-10个囊胚。五、基因敲除小鼠的建立选择嵌合率高的雄性子鼠×野生型雌性小鼠。六、Cre-loxP系统、FLP/FRT系统和条件性基因敲除 Cre/loxP：来自P1噬菌体，Cre重组酶基因和loxP序列位于P1噬菌体基因组内，loxP是Cre酶的识别序列。FLP/FRT：来自酵母，FRT是FLT酶的识别序列。Cre（FLP）重组酶有删除/整合、倒位、转位等功能。基本策略是通过类似于基因敲除的方法将两个loxP位点同向引入倒要删除的基因片段两侧。建立条件性基因敲除需要分三步进行：1、通过同源重组的方法在待测删除片断的两侧引入同向的loxP位点（此步同ES细胞的打靶，只是载体不同），用Cre的瞬时表达载体转染ES细胞克隆，在Cre酶下发生DNA重排。2、构建一个在特定组织和发育阶段表达Cre酶的转基因小鼠。 3、将前两步获得的小鼠杂交，在子代小鼠转筛选特定组织中基因敲除的小鼠。七、基因敲入基因敲入：用一个设计好的基因片段来取代基因组中的特定片段和将一个设计好的基因片段插入到基因组的特定片段中，这一技术也是建立在Cre－loxP系统基础上。基因敲入有两条途径删除选择标记基因：第一条途径是引入loxP位点的同源重组后，引入Cre基因瞬时表达载体，在ES细胞内瞬时表达Cre，删除两个loxP位点之间的序列，然后用该ES细胞建立相应的小鼠品系。第二条途径是先引入loxP位点的ES细胞建立一个小鼠品系，与一种Cre转基因小鼠品系杂交，最后建立基因敲入的小鼠品系。八、大规模ES细胞突变库的建立在ES细胞中利用基因捕获方法建立随机突变的ES细胞库是目前广受瞩目的研究计划。基因捕获（gene trap）技术有很多形式，在建立ES细胞突变库中最常用有两种：启动子捕获和3‘poly A信号捕获。启动子捕获：将不带启动子的筛选基因（LacZ、neo）和完整的polyA信号序列组成打靶载体，在筛选基因前可放一个RNA剪接受体，将载体转染ES细胞，进行随机插入ES细胞染色体。如果筛选基因恰好插入内源基因启动子下游，并在ES细胞中表达，那么筛选基因就可被转录，通过抗性筛选。因插入导致基因的失活，相当于进行了基因打靶过程，可以实现高通量的基因突变库，获得大量插入靶点明确的ES细胞克隆。 3‘端加尾信号捕获：利用一个缺失polyA信号的选择基因，置于广泛表达的启动子下游，同时在筛选基因下游放置RNA剪接的共体序列，构建打靶载体，利用该打靶载体转染ES细胞后，如果筛选基因恰好位于某加尾信号上游，那么筛选基因在转录时可以利用内源基因的polyA信号补上polyA序列，使得筛选基因的倒翻译。筛选具有抗性的ES细胞克隆就能富集这些插入事件。

冻胚等级什么意思

冻胚等级就是冷冻胚胎的等级。

首先冻胚是指冷冻胚胎，它是一种世界上唯一一个成熟的保存生育功能的唯一成熟方法。这种技术是将通过试管培育技术得到的胚胎，存置于零下196℃的液氮环境中，得到长时间保存。

冻胚等级就是指冷冻胚胎的等级，各医院的划分等级不一样。

胚胎等级划分：

各医院的划分等级不一样，使用AA级囊胚评级的医院是非常少的，而AB级的就比较常用。就拿D3胚胎的评级为例，如下：

1、一级的胚胎发育速度是处于一个正常的状态，细胞质均一，也没有空泡。并且卵裂球也比较均匀、数目相等，其中最主要的是一级胚胎的碎片数量非常的少。

2、二级的也是胚胎发育速度正常，卵裂球的好坏和一级一样，它的数目均等，细胞质均一，也没有产生空泡，碎片只占了百分之五到百分之十。

4、四级的是胚胎发育速度是异常的状态，卵裂球也是非常的不均匀，并且数目也不均等，细胞质不均一和有大量空泡，碎片大于了百分之十五。

由上述可知，试管婴儿冷冻胚胎等级级别的好坏。

试管婴儿冷冻胚胎等级级别的好坏也是决定试管婴儿成功关键因素，等级级别的好坏是依次下降的。例如一级和二级称之为优质胚胎，一级、二级和三级又可以统称为可冷冻胚胎或者可移植胚胎。

扩展资料

冷冻胚胎技术的作用及效果：

对不孕症病人进行“试管婴儿”的疗程中，一般会借助促排卵药物的刺激来增加成熟卵子数，往往可使卵巢一次生长十个以上的卵子。

但实际上在每一次的“试管婴儿”疗程中，只有1-3个胚胎移植回子宫腔。

植入过多的胚胎可能增加多胞胎的危险性，因此剩余的胚胎可进行冷冻保存。

对多囊卵巢综合征患者而言，冷冻复苏的胚胎比应用传统的新鲜胚胎移植技术可以获得更好的临床结果，活产率提高约7％。”

如果在治疗的周期没有成功，保存的胚胎可以在以后的自然排卵周期或激素替代周期移植回母体，不必再进行超排卵，不但可免除打针的痛苦，也可节省不少费用。

在技术方面从慢速冷冻到冰晶化快速冷冻的方法(Vitrification)，两者皆提供良好保存法。Vitrification的方法快速但成本较高，因为方法快速且存活率及怀孕率都相当好。

冷冻胚胎必须选择质量好的胚胎，因此胚胎评分标准也很重要，希望把具有发育潜能的胚胎予以冷冻，将来才可以提供病人做日后解冻使用。

冷冻胚胎是目前冷冻方法中最常使用方法，但在某些国家因为信仰与法律规定，无法冷冻胚胎只能冷冻卵子，不过冷冻胚胎算是一种技术纯熟的方法，提供很多病人使用。

参考资料：百度百科：冷冻胚胎

中国网：美国试管婴儿的胚胎如何划分等级

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