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每个做试管婴儿的人都会经历术前检查、促排卵、取卵(取精)等一系列过程,取完卵后在家焦急地等待3天后的结果,那这3天,精子和卵子又经历了什么?过了3天拿到了实验室结局告知单,急切地想知道我的胚胎发育好不好,是几级胚胎哈?是不是优质胚胎?普通胚胎和优质胚胎怎么看,有什么区别?其他人都有冷冻,为什么我的要养囊?,这篇文章将一一为你解答。
我们的工作流程是这样的:上午女方取卵,男方取精。我们把这一天定义成第0天,记做Day 0
(经阴道穿刺取卵示意图)
女方取卵,穿刺取出来的其实是卵泡液,卵子就生活在卵泡液中。卵泡液经过卵子操作平台,实验室工作人员在显微镜下,从血淋淋的卵泡液中用细管吸出卵子,用干净的培养液洗涤2次,把卵子边上的血性液体洗掉,然后放置在培养液中,放入培养箱内,等待和精子受精。
(图中显示显微镜下看到的卵子,是不是和你想象中差异很大哈)
女方取卵的同时,男方取精。取出的精液放置在室温下半个小时至1个小时,待精液液化后,进入洗精操作平台,精子经过洗涤后,那些活力差的精子会被淘汰掉,留下来的基本上都是活蹦乱跳的好精子。
(洗好的精子先放在这样的管子里)
如果洗涤后,活动精子数量够多,一般考虑做第一代试管婴儿(精子自己钻进卵子内完成受精);
(第一代试管婴儿,精子围绕在卵子周围)
如果洗涤后,精子数量很少,一般考虑做第二代试管婴儿(将精子直接注射入卵子内完成受精)。
(第二代试管婴儿,将金子注射入卵子内)
如果前次做的是第二代试管婴儿,那么一般本次也默认做第二代试管婴儿。
这个授精方式的选择,并不像买家电、买手机,第二代就一定比第一代来的好。具体做第一代还是第二代,临床医生、实验室医生会根据你的具体情况决定,选最适合你的。
下午一点半左右开始授精。如果你是做第一代试管婴儿,实验室工作人员会把洗好的精子,按照每个卵子加1万个左右精子的比例,将精子加入到卵子周围,让精子自己钻入卵子内,完成受精。(根据每个中心的经验,加入精子个数会有所差异)。如果你是做第二代试管婴儿,实验室工作人员会挑选与卵子相对应个数的的精子,将精子一对一地注射入卵子内,使其完成受精。
取卵后的第一天(Day 1),观察受精情况。实验室工作人员会在显微镜下观察每个卵子的受精情况。当然,这个就像一场考试,也是几家欢乐几家愁。有些人全部受精了,有些人部分受精了,也有情况很糟糕的一个都没有受精。至于受不受精,完全取决于卵子和精子质量。
实验室工作人员怎么样评价精子卵子有没有受精呐?原核,实验室工作人员根据原核的有无来判断是非受精。
(箭头所指示的两个圆圈即为原核)
正常受精可以看到两个原核,记录为“2PN”。异常受精或没有受精,可以见到以下情况:0PN,1PN,3PN,4PN……。至于怎么出现这些异常受精的,我们下次再说。
观察完后,将胚胎放入新的培养皿中,换上新的培养液。这一天受精卵会分裂成2个细胞
第二天继续培养,这一天受精卵会分裂成4个细胞。
(第二天,4细胞)
取卵后第3天(Day 3)早上,观察胚胎质量。激动人心的时刻到了,到了揭晓成绩的时候啦。
第3天,一般会分裂成8个细胞,但有的细胞分裂地快一点,有的细胞分裂地慢一点,一般6-12细胞都是正常的。光从个数无法说明胚胎质量。我们还会观察胚胎的外观和碎片率,对胚胎进行分级(以下内容了解即可):
Different stages of scoring a day 3 embryo-evaluating the number of cells, amount of fragmentation and symmetry of the cells(blastomeres)
(Bączkowski et al., Reproductive Biology, volume 4 No. 1, pgs. 5-22)
1级:胚胎卵裂球大小均匀,形态规则,透明带完整,胞质均匀、清晰,胚胎内碎片<10%;
2级:胚胎卵裂球大小略不均匀,形态略规则,胞质可有颗粒现象,碎片10%-20%;
3级:胚胎卵裂球大小明显不均匀,可有明显的形态不规则,胞质可有明显颗粒现象,碎片21%-50%;
4级:不可用胚胎,细胞大小严重不均匀,胞质可有严重颗粒现象,碎片超过50%。
完美的8细胞胚胎
Embryo picture of a"perfect" looking 8-cell embryo(day 3 embryo)
There is no embryo fragmentation and the cells are very even, regular, and similarly sizedWe call this is a"high quality" day 3 embryo(author Richard Sherbahn MD)
细胞数6-12个,碎片率20%以内,评级1-2级,可称为优质胚胎。我们中心记录方式为:细胞数—碎片率—评级,例如:8-5%-2,即8细胞,5%碎片率,2级。优胚就像优等生,有较高的怀孕成功率。但要说明的是,其他普通胚胎也是可以怀孕的。
胚胎比较多的,一般会把它们冷冻,等以后解冻使用。一般前2管,每管会放1-2个优质胚胎,第3管开始一般会多放几个胚胎。
我们的冷冻记录方式如下:
F1:①6-1②8-2 F2:①8-15%-2②10-15%-2
F3:①②③④⑤ F4:①②③④
以上代表您一共冷冻有4管胚胎,分别用F1、F2、F3、F4来区分,第一管F1里面有2个胚胎,分别是6细胞,1级;8细胞,2级;第2管F2里面有2个胚胎,分别是8细胞,15%碎片率,2级;10细胞,15%碎片率,2级;F3有5个胚胎,F4有3个胚胎。
如果身体条件很好,体内激素水平恢复正常,子宫内膜条件适合移植,则在这一天行鲜胚移植,根据情况,会挑选1-2个胚胎进行移植。
(B超阴道下,将胚胎注射入子宫)
多数人取卵后身体尚未恢复,体内激素水平一般比较紊乱,所以不行胚胎移植,将所有可用胚胎冷冻。
如您的胚胎较多,建议冻存2管左右的优质胚胎,其余胚胎养囊处理。什么是养囊?就是让胚胎在实验室培养液内再生长2-3天,看看有没有发育潜能,发育潜能好的,能够继续发育成囊胚;发育潜能差的,一般就无法存活。这是一个优胜劣汰的过程,模拟了体内生长过程,减少冷冻管数及费用,同时减少移植失败的次数。
如果您的胚胎质量比较一般,但经过评估后丢弃又可惜了,也建议养囊。有发育潜能的就能够继续存活下来,然后行囊胚移植,囊胚移植更接近人体正常的种植过程。
当然,养囊会损失一部分胚胎,这个您需要有心理准备,但一般来说养囊不成的胚胎,移植到体内受孕概率也是很低的。
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目前全世界的试管婴儿医院胚胎等级划分标准并不统一,比如AA级囊胚评级非常稀有,AB级的囊胚似乎就比较常见。还有的可能用“811”这样的评级法来评定第三天的胚胎,而其他的可能用8A来表示(也就是说811=8A,只不过表达方式不同)。
美国试管婴儿的胚胎移植或胚胎冷冻一般在胚胎的第三天,或者是第五天。这是因为卵子刚取出来时只是单细胞,完成受精后的12—24小时,会在培养液里发育并分裂,到第三天一般是4-8细胞的胚胎;而到第五天,大约发展成上百个细胞,此时胚胎就是我们常提起的囊胚;界于两者之间(一般是第四天),还有一个阶段叫桑葚胚(因桑葚胚比较难评级,一般不做评级)。
第三天(D3)胚胎的评级从上往下,从左往右以此为为8细胞Ⅰ级的胚胎(8Ⅰ);8细胞Ⅱ级的胚胎(8Ⅱ);8细胞Ⅲ级的胚胎(8Ⅲ);8细胞Ⅳ级的胚胎(8Ⅳ);这里我们用罗马数字来表示,其实也可以用阿拉伯数字表示,意义一样。
目前世界上普遍采用形态学评分方法对胚胎进行评分,首先是记录胚胎的细胞(卵裂球)个数,然后再根据卵裂球大小均一程度、形态是否规则、碎片多少等指标对胚胎进行分级。
I级:胚胎发育速度正常,卵裂球均匀、数目均等,细胞质均一、无空泡,碎片不超过5%;
II级:胚胎发育速度正常,卵裂球均匀或大致均匀,数目均等或大致均等,细胞质均一、无空泡,碎片占5%-10%;(此处还有个说法是2.5级:大致均匀,有些碎片)
III级:胚胎发育速度大致正常,卵裂球不均匀/均匀,数目不均等/均等,细胞质中有少量空泡,碎片少于15%。
IV级:胚胎发育速度异常,卵裂球不均匀、数目不均等,细胞质不均一、有大量空泡,碎片大于15%。
级别的好坏,依次是Ⅰ级>Ⅱ级>Ⅲ级>Ⅳ级。Ⅰ级和Ⅱ级统称为优质胚胎,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级又统称为可移植/可冷冻胚胎。
第五天(D5)囊胚的评级第五天的胚胎就是囊胚期,这时候是根据囊胚腔的大小和是否孵化来将囊胚的发育分为六个时期:
1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;
2期:囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2;
3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积;
4期:扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄;
5期:正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出;
6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出。
处于3至6期的囊胚,还需对其内细胞团和滋养层细胞进行质量分级。
内细胞团分级:(内层细胞,将会继续发育成“胎儿”)
A级:细胞数目多,排列紧密;
B级:细胞数目少,排列松散;
C级:细胞数目很少。
滋养层细胞分级:(外层细胞,将继续发育成“胎盘”)
A级:上皮细胞层由较多的细胞组成,结构致密;
B级:上皮细胞层由不多的细胞组成,结构松散;
C级:上皮细胞层由稀疏的细胞组成。
希望以上的回答可以帮助到题主。
不同胚胎学家对第1-3天的分级系统可能不同,但主要考虑每天卵裂球或细胞的数量、卵裂球的大小和细胞质破碎程度。即使是大小不等的卵裂球和最小的碎片也意味着胚胎的质量更好。
而对于第5天的囊胚。一般来说,胚泡的分级是根据它们的膨胀程度、孵化状态、内部细胞团(ICM)的发育和营养外胚层的形成来进行的。一个完整的囊胚,具有紧密的ICM和营养外胚层,形成具有许多健康细胞的粘性上皮,通常被认为是一个很好的移植候选者。
好了,关于试管婴儿胚胎碎片4和试管婴儿成功率和什么有关的问题到这里结束啦,希望可以解决您的问题哈!
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