试管胚胎培养模拟环境，试管胚胎等级与成功率

各位朋友们好，相信很多人对试管胚胎培养模拟环境都不是特别的了解，因此呢，今天就来为大家分享下关于试管胚胎培养模拟环境以及试管胚胎等级与成功率的问题知识，还望可以帮助大家，解决大家的一些困惑，下面一起来看看吧！

试管婴儿怎么培养胚胎

试管婴儿怎么培养胚胎

试管婴儿怎么培养胚胎，不孕不育并不可怕，试管婴儿是许多不孕夫妇的最后选择，试管婴儿需要通过检查排卵、取卵取精。试管婴儿的好处还有很多。以下分享试管婴儿怎么培养胚胎。

一、什么是试管婴儿的胚胎培养?

胚胎培养是指人类配子以及接受体外受精治疗的胚胎培养，卵子和精子结合后，会把受精卵放在装有营养液的培养皿里，培养3-6天，让他从一个细胞分裂多个细胞，最后发育成胚胎或囊胚。

二、试管婴儿胚胎培养的过程?

1、卵子预处理

医生获得卵子后会争分夺秒的把卵子送入实验室，一般取卵手术室和实验室是相连的，最大程度缩短卵子在体外暴露的时间。培养师拿到卵子后第一时间做处理，拨开卵子周围的颗粒膜细胞，展现卵子真正的面容。

培养师会对卵子进行评级：成熟卵、未成熟卵、变异卵。只有成熟的卵是可用卵。一般超促排的方法获得成熟卵能够达到80%的概率，就是属于正常情况。

2、精卵结合

卵子准备的同时，另一边会看精子情况。培养师会先进行观察，如果蝌蚪们一个个生龙活虎，那我们就不用为之后的结合而操心。主要通过多精子自由和卵子结合，或通过单精子注射结合，形成受精卵，再让发育成胚胎。

3、胚胎分裂和培养

精子和卵子完成结合后，会把受精卵放在装有营养液的培养皿里，让他从一个细胞分裂多个细胞。

第一天：从1个细胞分裂成2个细胞

第二天：从2个细胞变成4个细胞

第三天：从4个细胞变成8个细胞

第四天：胚胎往往就挤在一起成为了一个大球，这个叫融合状胚胎

第五天：形成细胞团俗称囊胚。

试管婴儿的过程是怎样的

1、控制性超排卵

由于自月经周期的长短因人而异，同一患者不同周期也存在差异，所以不易安排取卵时间，而且自然周期中只有一个优势卵泡发育，受精后只能形成一个胚胎，而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。

所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能，以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的，提供多个胚胎移植，并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。

控制性超排卵一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调，再施与HMG或FSH排卵药物，刺激卵巢中的卵泡成长，依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量，患者的年龄及药物的使用剂量不同，所获得的卵子数亦不同。

2、监测卵泡

为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间，须利用阴道B超来监测卵泡大小，并配合抽血检查E2值(雌激素)，调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm，且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当，便可注射人绒毛促性腺激素(hCG)，促使卵泡成熟。在注射hCG后34-36小时取卵。

3、取卵

最常用的取卵方式是在的局部麻醉下，经阴道B超引导，将取卵针穿过阴道穹窿，直达卵巢吸取卵子，并立即在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中，置37°C的培养箱中培养。

4、取精

精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手，用【自】慰法留取精液。所给的小杯是无菌的，留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。

5、体外受精

取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中，共同培养18小时后，可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差，无法自然受精，则必须以显微注射法强迫受精(参考卵细胞浆内单精子显微授精)。

6、胚胎移植

受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据患者的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量，决定移植胚胎的数目，多余的胚胎可冷冻保存。

胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2-3天移植胚胎，我所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间，对体外培养的条件要求就越高，但推迟移植时间更符合妊娠生理，同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎，可提高妊娠率，降低多胎率。

7、胚胎移植后补充激素

目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。如果确定妊娠，则改用hCG继续补充到怀孕10周。

胚胎移植后14天，可由验尿或抽血确定是否妊娠。

试管婴儿养囊条件

1、卵子的质量精子的质量。实验室的环境。胚胎师的专业度。

2、而且培养的囊胚本来也不是一件容易的`事，对实验室的要求很高，实验室的氧气量，温度的变化都会影响最后的结果。而且精子和卵子的质量不好的话，胚胎也容易停止生长。

3、卵泡个数少，胚胎质量一般的建议不要养囊，养囊对胚胎质量要求比较高，一般胚胎移植是在取卵后第三天进行，这个时候的胚胎含有5~8个细胞，而囊胚是指胚胎在体外培育5~6天，达到数百个细胞，这个时候植入女方子宫就叫做囊胚移植。

什么是养囊

养囊也叫囊胚培养，是“囊胚是胚胎体外培养”的终末阶段，它通常形成于卵子受精后的第5-7天。自然状态下，人类胚胎以囊胚的形式植入母体。进行囊胚移植，能获得较高的胚胎植入率。因此，进行囊胚培养、囊胚移植，始终是医患双方都感兴趣的一个选择。

胚胎培养实验室更是精密仪器成堆的神秘场所，是人类科技的巅峰体现之一。但实际上，自然状态下，母体提供了胚胎免光照、恒温、恒气体分压（最符合胚胎需要的二氧化碳、氧、氮分压）、最合理配比的营养物质及至关重要的必要细胞因子（并且所有这些物质保持动态更新、不存在代谢废物过度堆积）等条件。这些条件在实验室里，不是仅能粗略模拟，就是完全做不到。

第三代试管婴儿 – 胚胎着床前染色体检查

前言

PGS/ PGT－A，胚胎着床前染色体检查，或称胚胎着床前染色体整倍体检查，也就是一般俗称第三代试管婴儿。这个技术是借由植入前检查胚胎染色体是否正常，来提高胚胎植入后的怀孕率、或是来降低胚胎植入后的流产机会，来达成早日怀孕的目标。

这篇文章就来跟大家说明，PGS/ PGT－A的好处、限制，以及要注意的地方。

PGS胚胎着床前染色体检查

胚胎着床前染色体检查：

PGS：Pre－implantation（着床前） Geic（基因）Screening（筛检），现在又称PGT－A：Preimplantation（着床前） Geic（基因）Testing（检查）for Aneulploidy（非整倍体）。是借由现代生物科技技术，在胚胎着床前检查胚胎的染色体是否正常，来降低试管婴儿流产的机会，进而提高试管婴儿植入后的怀孕率。

谁需要 PGS？

高龄、重复性试管失败、染色体异常夫妻，建议接受PGS。

高龄

随着女性年纪增长，卵子品质会开始下降。超过34岁就认为是高龄，而超过38岁试管的成功率就会开始急速下滑，如果超过40岁就会更加困难。

根据统计，女性卵子染色体异常机会与年龄是正相关。20岁女性每20颗卵子才有一个卵子含有正常染色体，30岁女性则是每30颗卵子才有一个卵子有正常染色体，而40岁女性就需要40颗卵子才有一个卵子正常。

因此，高龄女性接受试管婴儿疗程，可以考虑PGS优先剔除染色体不正常的胚胎，来降低胚胎植入着床后的流产率，并且提高单一次胚胎植入成功的机会。

重复性试管失败

一般来说，一次试管的怀孕率大约50％～60%，因此如果接受试管胚胎植入三次应该有80%~ 90%的怀孕率。如果胚胎植入三次，都没有胚胎着床成功，除了进一步检查之外，应该考虑胚胎染色体是否不正常的比例偏高，所以应该就由PGS来找出正常胚胎，来提高胚胎着床的机会。

染色体

一般正常人细胞内有23对（总共46条）染色体，男生是46XY，女生是46XX。

人体在制造卵子跟***的过程中，染色体会进行减数分裂（也就是从46条，减少成23条）。各自带有23条染色体的卵子与***，结合受精之后，就会形成有46条染色体的胚胎，最后着床、发育、生产，就是一个正常的宝宝。

然而，在精卵制造的过程中，会有染色体分裂出错的状况，因而形成带有不正常染色体的卵子与***。这种不正常的精卵结合后，就会发育成不正常的胚胎。多数不正常的胚胎会自然淘汰（也就是不会着床）、或是会自然流产（着床后无法发育），少数不正常的胚胎会存活而生下染色体异常的宝宝，最常见的就是唐氏症。

而少部分夫妻，因为自身染色体有异常（可能是染色体微小片段缺失、可能是染色体反转、可能是染色体镶嵌型，但是不影响自身成长发育）。但是在精卵制造的过程中，无法自行修复，因此所产生的***跟卵子有染色体异常的比例就很高，而精卵结合之后形成的胚胎也有异常。这样的胚胎，无法正常着床、无法正常发育，几乎百分之百会流产。

因此，PGS可以预先知道这些异常的胚胎，进而降低胚胎植入后流产的机会。

传统试管婴儿的结果

传统试管婴儿的结果跟自然怀孕的过程也是相同。打针排卵***的卵子品质、跟先生取精的***品质，其实跟一般状况是雷同的。根据统计，传统试管婴儿的植入的胚胎中，即便是外观品质最好的第五天5AA囊胚，植入后也有15％～ 20%的流产率。

流产的原因前面有提到，就是制造***跟卵子的过程中，出现了问题，因此虽然外观上看起来品质最好，但是胚胎内部的染色体是异常的，异常的胚胎流产的机会大大的提高。（当然，外观越好的胚胎，染色体正常的比例越高。外观越差的胚胎，染色体正常的比例越低。）

所以我们发现，传统试管疗程，随着年纪越高，胚胎着床率越低、流产的机会也是越高。

PGS可以降低流产机会

但是，随着生物科技的发展，NGS（次世代染色体分析技术）的发明，配合胚胎切片及胚胎染色体检查，我们可以借由植入染色体正常的胚胎，来降低胚胎植入着床后的流产机会、也可以提高每次植入的怀孕率、也可以提高每次植入的活产率。

传统试管 vs.第三代试管婴儿

我们来详细比较「传统试管」跟「PGS胚胎着床前染色体检查（第三代试管婴儿）」的差异。

传统试管，单一周期植入两个胚胎（第五天好囊胚）的怀孕率大约50%~ 60%，胚胎植入着床后的流产率大约15%，费用就是一般试管婴儿费用，而从开始取卵到验孕的时间大约一个月。

第三代试管婴儿，胚胎植入周期植入一个胚胎的怀孕率有50%，胚胎植入着床后的怀孕率小于5%，整体的费用（包含打针、取卵、养胚、切片、染色体检查、胚胎解冻植入等）大约可以做三次传统试管婴儿，时间最少需要三个月。

可以看到，第三代试管跟传统比较，有高怀孕率、低流产率的优点，但是高费用、需时间长就是受到比较多限制的地方。

再次复习一下：胚胎植入前染色体检查PGS，植入染色体正常的胚胎，单一胚胎的怀孕率有50%，流产率小于5％。 PGS的步骤

上面提到，PGS从开始到胚胎植入验孕需要三个月，我们来看看PGS的步骤有哪些。

PGS的步骤简单可以分为三部分，每个步骤也可以分为三个细节，现在就来仔细了解一下。

PGS三步骤

步骤1.：打针、取卵、养胚胎

步骤2.：胚胎切片、染色体检查

步骤3.：建立内膜、解冻胚胎植入

步骤1.

打针、取卵、养胚

这个阶段就是为了要培养胚胎，也跟传统试管婴儿胚胎植入前的步骤雷同。

步骤1.1：MC第二天开始打针，排卵***。

跟传统试管一样，MC见红的第二天或是第三天开始接受排卵***，时间到注射破卵针***卵子成熟。就可以皆下一步。

步骤1.2：全身麻醉取卵手术。

跟传统试管相同，接受静脉全身麻醉、不用插管，接受取卵手术。取卵时间大约30分钟，前面准备需时30分钟，后面术后麻醉恢复需时一小时。取卵节术后，卵子就会交给胚胎技术师，开始后续胚胎培养的过程。

步骤1.3：精卵结合、胚胎培养

接受PGS的疗程，精卵结合（也就是卵子授精）的方式是用ICSI（单一精虫显微注射），而非传统精卵自然结合（Insemination）。使用ICSI可以避免额外***的染色体影响后续染色体检查的正确性。受精后的卵子就开始进入胚胎培养。

步骤2.

胚胎切片、染色体检查

这个步骤是PGS最复杂的地方。养到第五天、第六天的胚胎，经过一连串的处理，准备接受检查。

步骤2.1：胚胎培养到第五天、第六天

过去PGS的胚胎切片，多是取第三天的胚胎做胚胎切片。但是，近年国际文献发现，第五天、第六天囊胚切片结果更为准确。因此，近年PGS国际标准建议是：第五天、第六天囊胚（Day 5、Day 6 Blastocyst）接受切片检查。

选定胚胎之后，胚胎需要接受雷射打薄人工协助孵化（AH，Laser Assisted Artificial Hatching）。雷射打薄是将胚胎的外壳用精准雷射光打一个小洞，让部分胚胎细胞能够膨出，到胚胎壳之外，方便皆下来做胚胎切片。

步骤2.2：胚胎切片

培养到第五天的胚胎，部分的胚胎细胞膨出到壳外之后，胚胎师就会用胚胎切片的技术，摘取五个～六个囊胚外圈细胞（滋养层细胞），这个技术也称为滋养层切片（Trophectoderm Biopsy）。摘下来的细胞会装在PGS专门用的染色体分析试管，准备接受染色体分析。

步骤2.3：染色体检查、冷冻胚胎

细胞样本则利用NGS的方式做染色体分析。NGS是次世代染色体分析，利用人体染色体基因库中相同的片段，做电脑分析计算后，分析胚胎染色体正常与否。NGS这种新方式，较传统FISH等方式，准确度较高、但费用也较高，但也是现今国际检查的标准方式。

所以，PGS结合 NGS才会是比较正确的作法。

切片后的胚胎，会被玻璃化冷冻在零下198度的液态氮桶里，静待染色体检查的结果。玻璃化冷冻的胚胎，有99.9%以上的解冻存活率，是现在冷冻胚胎的唯一标准。胚胎保存在液态氮桶里，环境稳定，可以保存十年没有问题。

步骤3.

建立内膜、解冻胚胎植入

染色体分析完成后，如果有染色体正常的胚胎，就可以开始第三步骤：解冻非胎植入。这个步骤跟传统试管解冻胚胎周期类似。

步骤3.1：MC第二天开始口服药物建立内膜

服用雌激素、模拟正常生理荷尔蒙、使内膜逐渐增厚。（这个时期禁用黄体素，会失败、会失败。千万不要相信网路谣言：黄体素可以帮助胚胎着床，所以提早使用黄体素。这个时期使用黄体素，只会让内膜因为提早黄体化而无法让胚胎着床。）

步骤3.2：良辰吉时

这个时候才能开始使用黄体素。一般使用雌激素让内膜长到0.8公分以上，就可以计算时间，开始使用黄体素

步骤3.3：解冻胚胎植入

使用黄体素五天之后，就可以准备解冻胚胎植入。胚胎植入后两个星期，就可以验孕。

正常胚胎

再来，简单的分享临床经验。一个PGS周期大约有多少正常胚胎，年纪如果小于38岁，一次取卵周期如果有12个卵子，受精后大约有10个受精卵，第五天大约可以有3~5个囊胚可以切片，切片后大约有2~3个正常胚胎。

但是，如果是有夫妻染色体异常、年纪超过38岁、或是少于12颗卵子，可能就不会有那么多染色体正常的胚胎。

所以，在有打算PGS的夫妻，需要在疗程前接受一对一专业咨询，才能够精准的分析评估。

结论

PGS（第三代试管婴儿）合并NGS可以提高单一胚胎植入后怀孕率，降低胚胎植入着床后流产机会。如果是高龄、有重复试管失败经验、或是有夫妻染色体异常的问题，建议使用PGS来提高试管成功机会。

试管婴儿囊胚培养成功率

很多患有不孕不育的家庭，一般都会通过试管婴儿手术来怀上一个健康的宝宝，试管婴儿作为一种辅助生殖技术，有利也有弊，只是现在还是有不少的人对它不了解，就像不知道还需要囊胚培养一样，那么试管婴儿囊胚培养成功率是多少呢?

试管婴儿养囊成功率在百分之四十左右。因为最好的养囊时机是形成受精卵的第六天，这段时期囊胚非常不稳定，这就需要一个非常严密的环境供它生长，我们要给予胚胎营养，同时密切的和观察并做好记录，这个过程不能有一点疏忽。

现在试管婴儿技术虽然很完善，可是成功率依然不是百分之百，养囊相对于自体孕育来讲有很大的好处，但不是依然不能保证胚胎百分百存活，这也需要有较好的胚胎质量。另外母体的因素也非常重要，妈妈要保持好的心态，健康的饮食习惯和作息规律。

当养囊不成功时，也不要失望，遵医嘱查找原因，同时调整身体和心理状态，因为养囊也是一个筛选的过程，质量越好，成功率越高，相反则越低，切忌不要以为养囊就高枕无忧了，因为情况是瞬息万变的，但是也希望每个想要孩子的女性心想事成。

01卵细胞男性精子的品质

女性卵子数量少、试管胚胎品质一般，不建议养囊。并且精卵的品质不太好得话，试管胚胎也非常容易终止生长发育。养囊对试管胚胎品质规定较为高，品质较差的女士而言，很有可能培养不上胚胎环节，造成试管胚胎全军覆灭。针对那样的女士而言，一般建议尽快移殖，有的试管胚胎没法在试验室的自然环境下生存，在孑宫里可能会生存，终究孑宫才算是试管胚胎蕞佳的存活，投身自然环境。

02试验室的自然环境

塑造胚胎并不是一件非常容易的事，对试验室的规定很高，试验室的co2量，温度的转变都是影响蕞后的结果。

可是，胚胎移殖胚胎着床率比一切正常试管胚胎高，由于胚胎级别比较好，生长发育快。针对身体情况不宜多胎妊娠的女士而言，移植囊胚能够做到高些的怀孕率，减少多胎的危险因素。

03试管胚胎师的技术专业水平

试管胚胎在塑造室里，需要维持24钟头恒温恒湿设备超净，18台大中型精卵结合塑造器全天工作中，24钟头Timelapse系统及工作人员监控器，温度环境湿度co2N2浓度值，全是有历经反复审校的标准，而每一个医院门诊的标准可能不一样，事实上许多初创期的中小型的塑造实可能乃至没有严苛标准。

试管胚胎师在观查实际操作中，将塑造试管胚胎的培养液取下，放进特别制作的相近新生婴儿教养员器的操作箱中开展实际操作。操作箱需要严控二氧化碳及co2的占比，造就出一个仿真模拟孑宫的优质自然环境。

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